枱式的分光光度計
貝克曼(Beckman) IR-1 分光光度計, 1941年
貝克曼DB型號分光光度計 (一個雙光束型號), 1960年
用於圖形行業的手持式分光光度計[ 1] 。
在化學中,分光光度法 (英語:Spectrophotometry )是材料的反射或透射特性隨波長變化的定量測量[ 2] 。它比一般的電磁光譜法 更具體,因為分光光度法處理可見光 ,近紫外光 和近紅外光 ,但不包括時間分辨光譜 技術。
分光光度法是一種工具,取決於對有色化合物吸收多少光,對分子進行定量分析。 分光光度法使用稱為分光光度計的光度計 ,該光度計 可以測量光束強度作為其顏色(波長)的函數。分光光度計的重要特徵是光譜帶寬(它可以透射通過測試樣品的顏色範圍),樣品透射率的百分比,樣品吸收率的對數範圍,有時還包括反射率測量的百分比。
分光光度法通常用於測量溶液,透明或不透明固體(例如拋光玻璃)或氣體的透射率或反射率。
分光光度法的使用涉及多個科學領域,例如物理學 ,材料科學 ,化學 ,生物化學 ,化學工程 ,和分子生物學 [ 3] 。 它們被廣泛用於許多行業,包括半導體,激光和光學製造,印刷和法醫檢查以及化學物質研究實驗室。 分光光度法通常用於酶活性的測定,蛋白質濃度的測定,酶動力學常數的測定以及配體結合反應的測定。最終,分光光度法能夠根據對照或校準物來確定什麼 通過計算觀察到的波長,目標中存在的物質以及確切的數量。
將含有各種波長的混合光分散為各種單色光 ,使每種單色光依次通過某一濃度溶液,測定溶液對每種光波的吸光度,繪出吸收光譜。由於物質的吸收光區域和強度與結構密切相關,根據特有的吸收光譜可作分子結構分析。此外,利用特定波長的單色光分別透過標準溶液與待測溶液,比較其吸光度,可作定量分析 。
分光技術中包括了分光光度計(英語:spectrophotometer )是一種分析光 的強度 的物理 實驗室設備 ,可以量測不同波長 光 的強度 ,分析波長 與光 強度 的關係。亦可以量測特定物質的吸光度 或透光度 。目前有許多種分光儀,如指針型、數字型。
紫外-可見分光光度法 (Ultraviolet–visible spectroscopy,縮寫:UV-Vis),又稱「紫外-可見分子吸收光譜法」,是以紫外線 -可見光 區域電磁波 連續光譜作為光源照射樣品,研究物質分子 對光吸收的相對強度的方法。通過分子紫外-可見分子吸收光譜法的分析可以進行定性分析 ,並可依據朗伯-比爾定律 進行定量分析 。